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高中生物:依课标,强思维;注基础,重能力;思学生之所想,解学生之所惑.

 
 
 

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土壤中分解尿素的细菌的分离与计数  

2011-11-22 19:16:38|  分类: 教案设计 |  标签: |举报 |字号 订阅

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土壤中分解尿素的细菌的分离与计数


课题目标

(一)知识与技能

利用选择培养基分离细菌,运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数

(二)过程与方法

    分析研究思路的形成过程,找出共性和差异性

(三)情感、态度与价值观

    形成无菌不在的概念,养成讲究卫生的习惯

课题重点       对土样的选取和选择培养基的配制

课题难点       对分解尿素的细菌的计数

教学方法       启发式教学

课题背景分析

教材从尿素在农业上的重要用途切入,介绍了土壤中能分解尿素的细菌,进而说明这种细菌的作用是能够合成分解尿素的酶。教学中,教师可以联系生产生活实际,使学生对尿素以及分解尿素的细菌形成一定的感性认识。教材还简要地介绍了尿素的发现过程以及尿素合成的历史,这些都是科学、技术、社会教育的丰富素材。最后,教材明确指出了本课题的目的,有助于学生准确把握课题的方向。

研究思路

一、筛选菌株w.w.w.k.s.5.u.c.o.m

1)实验室中微生物的筛选应用的原理

问题情景:

科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为热泉中高温条件有利于耐热细菌生长的,而淘汰了其他绝大多数微生物,请通过该事例总结实验室中微生物的筛选应用的原理。

得出结论:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、PH等),同时抑制或阻止其他微生物生长 

问题情景:

请根据教材中土壤中分解尿素的细菌生长特点制定出筛选的原理。

 

问题情景:

在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称作选择培养基。配制选择土壤中分解尿素的细菌培养基的方案。

 

二、统计菌落数目

问题情景:

通过我们掌握的微生物有关知识,思考总结对微生物个体数的计数方法。

(提示:微生物个体小,不能直接用肉眼计数,可借助什么仪器?如果不用该仪器,可直接观察到什么群体结构?他是怎么生长形成的,通过该结构计数,你将怎样操作?该方法的关键步骤是什么?否则计数会出现怎样的误差?为了减小误差,应怎样操作?计算方法是什么?

三、实验流程

1.土壤取样  从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3 cm左右,再取样,将样品装入事先准备好的信封中。

2.制备培养基  准备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基将菌液稀释相同的倍数,在牛肉膏蛋白胨 培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基 上的数目,因此,牛肉膏蛋白胨培养基可以作为对照,用来判断选择培养基是否起到了选择作用。由于初次实验,对于稀释的范围没有把握,因此选择了一个较为宽泛的范围:稀释倍数为103107。每个稀释度下需要3个选择培养基,1个牛肉膏蛋白胨培养基,因此共需要15个选择培养基,5个牛肉膏蛋白胨培养基。此外,还需要准备8个灭菌的试管和1个灭菌的移液管。

3.微生物的培养与观察  参考课本中图2-7的实验流程示意图,将10 g土样加入盛有90 mL无菌生理盐水的锥形瓶中(锥形瓶体积为250 mL),充分摇匀,吸取上清液1 mL,转移至盛有9 m L的生理盐水的无菌大试管中,依次等比稀释至107稀释度,并按照由107103 释度的顺序分别吸取0.1 mL进行平板涂布操作。按照浓度从低到高的顺序涂布平板,不必更换移液管。

将涂布好的培养皿放在30 ℃温度下培养。随着培养时间的延长,会有不同的菌落产生。比较 牛肉膏培养基和选择培养基中菌落的数量、形态等,并做好记录。

挑选选择培养基中不同形态的菌落接入含酚红培养基的斜面中,观察能否产生如课本中图2-10的颜色反应。

 

4.细菌的计数  当菌落 数目稳定时,选取菌落数在30300的平板进行计数。在同一稀释度下,至少对3个平板进行重复计数,然后求出平均值,并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。

四、课堂总结、点评

 

1、培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选 出菌落

对照的培养皿在培养过程中没有菌落生长,说明培养基没有被杂菌污染。牛肉膏培养基的菌落数目明显大于选择培养基的数目,说明选择培养基已筛选出一些菌落。

2、样品的稀释操作是否成功

如果得到了2个或2个以上菌落数目在30300的平板,则说明稀释操作比较成功,并能够进行菌落的计数。

3、重复组的结果是否一致

如果学生选取的是同一种土样,统计的结果应该接近。如果结果相差太远,教师需要引导学生一起分析产生差异的原因。

 

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